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免疫组化

2018-06-02| 发布者: admin| 查看: 128

疫学的抗原-抗体反应为理论基础,应用理化方法显示细胞结构的物质成分,进而分析研究细胞和组织的代谢、功能及其形态变化的实验技术。该方法将抗原-抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有效结合起来,即用酶标记抗体,以酶与底物的显色反应对抗原进行示踪,并对呈色反应后的免疫阳性产物做半定量分析。

免疫组织化学

       免疫组织化学(Immunohistochemistry)是一项以免疫学的抗原-抗体反应为理论基础,应用理化方法显示细胞结构的物质成分,进而分析研究细胞和组织的代谢、功能及其形态变化的实验技术。该方法将抗原-抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有效结合起来,即用酶标记抗体,以酶与底物的显色反应对抗原进行示踪,并对呈色反应后的免疫阳性产物做半定量分析。

我们集结了中科院免疫组化资深顾问以及众多免疫组化专业人士,为您提供免疫组织化学(IHC)、免疫细胞化学(ICC)、免疫荧光、组织芯片、原位杂交(地高辛探针)等组织形态学方面的一站式服务,包括实验设计、实验操作、图片处理以及分析等方面,也可以承接阶段性的实验。检测指标可以是肿瘤标志物、癌基因及癌基因蛋白、细胞周期蛋白、凋亡基因蛋白、细胞表面抗原等。

 

免疫组化 
1.概念和原理 
  免疫组化(immunohistochemistryIHC)是利用抗原与特异性抗体结合的原理,通过标记的显色系统来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。根据标记物的不同分为免疫荧光(FITC)、免疫酶(辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶)、和免疫金属(铁蛋白金)等技术。(1)免疫荧光技术是将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。抗原抗体复台物中的荧光素受激发光的照射后发出荧光,从而确定组织中的抗原定位或定量。(2)免疫酶细胞化学技术是目前免疫组织化学研究中最常用的技术基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究。(3)免疫胶体金技术是用胶体金标记一抗,二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性,定位或定量研究。由于胶体金的电子密度高,多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究。 
2.科研和临床应用 
 凡是组织细胞内具有抗原性的物质,如肽类,激素、神经递质、细胞因子、受体、表面抗原等均可用免疫组织化学方法显示,因而目前在基础与临床科研中被广泛应用。在分子生物学研究方面,免疫组化以其定位准确,形态与功能相结台的特点,被广泛应用于肿瘤相关基因和其他生物分子结构功能研究。 
 IHC应用领域包括以下几个方面:确定细胞类型和组织分型,探讨肿瘤起源或分化表型和分化程度,肿瘤预后用药敏感性筛选。检测鉴定细胞表面和细胞内抗原,对白血病/淋巴癌的良恶性的诊断、具体淋巴瘤分型诊断提供依据。鉴定病变性质,如:滤泡型淋巴瘤,90%以上肿瘤性滤泡细胞有bcl-2的高表达;而在滤泡反应性增生时,滤泡反应中心的细胞不表达bcl-2蛋白质,而其它细胞则表达。发现疾病特异性基因产物。寻找感染病原体,如:巨细胞病毒(CMV)、人乳头状瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒(HSV)、乙型肝炎病毒(HBV)等病毒检测。 

 免疫荧光检测技术

1.概念和原理

 免疫荧光检测技术是以荧光物质标记的特异性抗体或抗原作为标准试剂,用于相应抗原或抗体的分析鉴定和定量测定,包括荧光抗体染色技术和免疫荧光测定两大类。

荧光抗体染色技术是用荧光抗体对细胞、组织切片或其他标本中的抗原或抗体进行鉴定和定位检测,可在荧光显微镜下直接观察结果,称为免疫荧光显微镜技术,或是应用流式细胞仪进行自动分析检测,称为流式免疫荧光技术。免疫荧光测定主要有时间分辨免疫荧光测定和偏振免疫荧光测定等。

2.科研和临床应用

免疫荧光检测方法准确可靠,可在短时间内确定病原体种类,检验时间从微生物培养检测所需的23天缩短至1h,大大节约了时间与成本。广泛应用于临床检测,特别对孕前检查及筛查具有重要意义。


 


 



 

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