致力于提升客户品牌形象、实现客户商业目标!-post/show_post

Commitment to enhance customer brand image,customer business goals!

细胞转染及质粒构建扩增

2018-06-02| 发布者: admin| 查看: 127

需要指出的一点,无论采用哪种转染技术,要获得最优的转染结果,可能都需要对转染条件进行优化

细胞转染

        细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛。

理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术,是目前转染效率最高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势。但是,病毒转染方法的准备程序复杂,常常对细胞类型有很强的选择性,在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点。

需要指出的一点,无论采用哪种转染技术,要获得最优的转染结果,可能都需要对转染条件进行优化。影响转染效率的因素很多,从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态,到转染方法的操作细节,都需要考虑。

质粒构建扩增

    质粒载体可以有效地运载外源基因片段进入受体细胞,可以独立自主大量复制并且很容易从宿主细胞中分离纯化,因而在分子生物学使用十分广泛。常用的载体可分为克隆载体和表达载体,根据载体进入受体细胞的不同,分为原核细胞表达载体、真核细胞表达载体以及穿梭载体。在目的基因的表达研究,基因、蛋白的功能研究中起着非常重要的作用。

       质粒扩增是大量获取质粒的一种化学生物学方法,通常包括将细菌质粒转化到大肠杆菌中,然后从大肠杆菌中收获大量质粒的过程。这一实验主要用于获取较多的质粒,质粒扩增需要的源头质粒量非常小,1微克的质粒都已经能够满足扩增的需要,这也使得质粒的使用和赠送变得非常容易。质粒的用途往往是用于转染细胞,通过转染的方式让细胞表达质粒中携带的基因,从而研究该基因对应蛋白的性能。在基础细胞生物学研究中起着非常重要的作用。

 

 

最新评论

昵称: 邮箱: