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双向凝胶电泳

2018-06-02| 发布者: admin| 查看: 113

双向电泳分为等电聚焦电泳和SDS电泳。等电聚焦电泳是在高电压的作用下使不同等电点的蛋白质固定在IPG胶条上不同的pH区间上,从而使蛋白质任等电点上被区分。

双向凝胶电泳技术

1.概念和原理

      双向电泳分为等电聚焦电泳和SDS电泳。等电聚焦电泳是在高电压的作用下使不同等电点的蛋白质固定在IPG胶条上不同的pH区间上,从而使蛋白质任等电点上被区分。SDS电泳则是将己在等电点上分离的蛋白质IPG胶祭转移到SDS凝胶上,通过电泳作用将胶条上相同等电点的蛋白质从分子量上分离,从而最终实现将组织、活细胞等来源的混合蛋白质在等电点和分子量上进行分离。

2.科研和临床应用

       双向电泳应用主要涉及蛋白质组数据库构建、蛋白质作图、差异蛋白质鉴定、新型蛋白质发掘、功能基因组计划、药物靶分子寻找与分析、肿瘤恶性标记物、病原苗毒性成分分析等。目前差异蛋白质组学仍是双向电泳应用最广泛的领域,可利用这项技术用于筛查各类疾病的早期诊断标记物、疑难疾病鉴别诊断标记物、恶性疾病预后相关蛋白质、疾病耐药相关蛋白质、不同疾病间相互作用蛋白质等。另外,欧美及日本等多国已利用双向电泳技术建立起了一个关于肿瘤及病原微生物的蛋白质组数据库。针对基因组或转录组数据库的生物体,组织,细胞,双向电泳还可进行其蛋白质组或蛋白质表达谱等方面的研究。

3.标本采集、保存、运输

抗凝管采集血液,根据实验目的不同,离心后分别取土清或细胞沉淀;尿液离心后取沉淀。所有送检前未裂解的细胞、组织、尿液沉淀、血清样品保存在-80℃冰箱中,送检时冷冻运输。由于蛋白质组学涉及的样品范围很广,对于具体样品的要求请详询。



 

 

 

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