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免疫印迹分析

2018-06-02| 发布者: admin| 查看: 120

免疫印迹即Western blotting,采用的是聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)电泳,被检测物是蛋白质。

免疫/蛋白质印迹技术

1.概念和原理

免疫印迹即Western blotting,采用的是聚丙烯酰胺凝胶(polyacrylamidegel electrophoresisPAGE)电泳,被检测物是蛋白质。经过PAGE分离蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质。以固相载体上的蛋白质作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测样品中特异性蛋白质。

2.科研和临床应用

     目前Western blotting主要作为科研用途被广泛使用,常用于不同样品Z间某种蛋白质定量和定性的分析,如:药物干扰后某种靶蛋白质表达量的变化、细胞处理前后某蛋白质表达量的变化、某种蛋白质表达与否及表达量对诊断治疗和预后的意义等。

3.标本采集、保存、运输

采集新鲜样品后-80℃保存,冷冻运输

 

 

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