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条件敲除

2018-06-02| 发布者: admin| 查看: 112

条件基因敲除是使靶基因在特定细胞类型或者特定发育阶段完全丧失功能的实验技术。

条件敲除 

      条件敲除(Conditional KO)策略是通过同源重组技术,在目的片段的两侧各引入一个loxp位点,其中,1st loxp是独立的loxp位点,2nd loxp位点旁边带有Neomycin标记,这里使用的PGK-neomycin两侧添加了FRT位点,即FRT-PGK-neomycin-FRT- loxp,可以在中靶ES克隆中表达Flpe重组酶去除PGK-neomycin标记,也可以在小鼠中完成,当然,也可以直接与组织特异性表达cre的品系交配,去除目的片段和筛选标记。

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